中国报告大厅网讯，氨苯砜作为一种具有抑菌作用的化合物，化学名为4,4′-磺酰基二苯胺(或4,4′二氨基苯砜)，分子式为C₁₂H₁₂N₂O₂S，呈白色结晶粉末状，临床上可用于部分皮肤疾病及麻风病的治疗，也可作为磺胺增效剂应用于水产品养殖中防治细菌性疾病。2026年氨苯砜行业呈现“监管趋严、检测精细化、现场化”的核心趋势，据行业数据显示，全球氨苯砜残留检测市场规模预计达到12.8亿元，其中动物源性食品检测占比超65%，牛尿液等非侵入性样本检测需求同比增长40%，传统检测方法已难以满足现场快速筛查的行业需求，研发高效、便捷、精准的氨苯砜检测技术成为行业发展的关键方向。以下是2026年氨苯砜行业趋势分析。

  一、氨苯砜的危害及检测现状

  《2025-2030年中国氨苯砜行业市场调查研究及投资前景分析报告》指出，氨苯砜具有较强的氧化能力，进入人体后会将血红蛋白氧化为血铁蛋白，导致血红蛋白失去携氧能力，进而引发贫血等血液性疾病，严重时可危及生命。基于其潜在危害，我国相关公告明确禁止在所有食品性动物中使用氨苯砜，且不得在动物食品中检出;欧盟也将其列为动物源性食品中的禁用药物。目前国内外针对食品中氨苯砜的检测主要集中在蜂蜜、牛奶、鸡肉、猪肉、鱼肉等样品，常用的仪器检测方法为高效液相色谱-质谱法(HPLC-MS/MS)，该方法可实现精确的定量分析，但存在设备昂贵、操作要求高、样品前处理复杂、检测成本高、检测周期长等不足，无法对大量样本进行快速筛查，也难以满足养殖过程中实时监测的需求。此外，已报道的酶联免疫吸附测定法(ELISA)和胶体金免疫层析法等快速检测方法，虽能实现组织类样本的快速检测和大量筛查，但存在检测滞后性，无法在养殖环节实现实时监测，且难以避免对动物造成伤害，因此亟需开发一种非侵入性、高效便捷的氨苯砜快速检测技术。

  二、氨苯砜胶体金免疫层析试纸条的研制材料与方法

  2.1 实验动物和主要试剂

  实验所用新西兰大白兔为6月龄，体重5kg，所有动物饲养和免疫程序按标准化方案执行。主要试剂包括氨苯砜、葡胺苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜标准品;牛血清白蛋白(BSA)、鸡卵白蛋白(OVA)，纯度≥99%;羊抗兔IgG;碳酸钾、氢氧化钠、异丙醇、戊二醛(GA)、蔗糖、二甲基甲酰胺(DMF)、吐温-20(均为分析纯);硝酸纤维素(NC)膜(CN140);样品垫、吸水垫、PVC底板;胶体金专用重悬液、样本专用复溶液。

  2.2 氨苯砜相关抗原与抗体的制备

  以氨苯砜-鸡卵白蛋白(OVA)偶联物作为免疫原，采用戊二醛法合成免疫抗原：称取氨苯砜5mg溶解于500μL二甲基甲酰胺(DMF)中，加入20μL 25%GA，4℃保持10min，用超纯水稀释5倍后，4℃避光放置15~30min，制备成A液;称取OVA蛋白20mg置于棕色小玻璃瓶内，溶解于4mL 0.05mol/L、pH=9.6的碳酸钠缓冲液中，制备成B液;在避光条件下将A液加入B液中并不断搅拌，合成氨苯砜-OVA免疫原，装入透析袋后，用0.01mol/L、pH=7.4的磷酸盐缓冲液进行透析。包被抗原氨苯砜-牛血清白蛋白(BSA)偶联物，参考氨苯砜-OVA的合成方式制备，透析后去除未与蛋白结合的小分子。

  氨苯砜多克隆抗体的制备：取6月龄新西兰大白兔，将氨苯砜-OVA免疫原与等体积弗氏完全佐剂混合乳化后，采用背部皮下多点注射方式进行首次免疫，每只兔注射0.5mL混合液;第3天进行第2次免疫，按氨苯砜-OVA与弗氏不完全佐剂1∶1的比例混合，注射剂量为400μL/只;分别在第30天、第45天进行第3次、第4次免疫，免疫剂量参考第2次，共免疫4次，后2次免疫采用乳化的弗氏不完全佐剂。间隔3周后，将0.3mL不添加佐剂的免疫原通过腹腔注射免疫大白兔，3天后刺穿心脏采集兔全血，4000r/min离心5min，收集血清即为抗氨苯砜血清，通过ProteinA柱子纯化获得氨苯砜多克隆抗体。

  2.3 氨苯砜多克隆抗体-胶体金标记物微孔试剂的制备

  取0.01%的胶体金溶液100mL，用0.1mol/L K₂CO₃调节pH值至8.0左右，加入氨苯砜多克隆抗体，室温下搅拌均匀后静置30min;加入1mL 10%BSA，继续搅拌30min，静置20min后，在4℃条件下12000r/min离心20min，弃上清液;沉淀使用20mL胶体金重悬液(含2%蔗糖、3%BSA、0.3%Tween-20，由0.04moL/L、pH=8.0的Tris-HCl配制)重悬，置于4℃冰箱中备用。将氨苯砜多克隆抗体标记胶体金后加入微孔中，100μL/孔，待冷冻干燥机冷阱温度降到-70℃后，微孔先预冻3h，再转移到冷阱中真空干燥24h，将冻干的混合试剂保存到干燥密封的环境中。

  2.4 氨苯砜胶体金免疫层析试纸条的制备与组装

  在NC膜的检测线(T)和质控线(C)处，分别包被适当浓度的氨苯砜-BSA偶联物和羊抗兔IgG抗体;在PVC底板上依次粘贴NC膜、样品垫、吸水纸，其中样品垫、吸水纸与硝酸纤维素膜搭接约2mm。将组装好的试纸条大板斩切成4mm宽的试纸条，在干燥条件下，室温密封于铝箔袋内保存备用。

  2.5 牛尿液样品处理与检测判定方法

  牛尿液样品处理：从待测样品管中取2mL牛尿液加入离心管中，室温下4000r/min离心5min，将离心后的上清液转移到2mL离心管中，即得到待检液。

  样品检测及结果判定：取待检液200μL加入到氨苯砜抗体金标微孔中，反复吹吸几次使微孔内部的红色物质完全溶解，待完全溶解后在微孔内反应3min，再从微孔内移取100μL加到试纸条的加样孔内，层析5min后读取结果，其余时间判读无效。结果判定标准：阴性(-)：C线比T线显色浅或两者颜色相同，说明样本中氨苯砜的含量低于检出限或不含氨苯砜;阳性(+)：T线显色比C线浅或T线不显色，说明样本中氨苯砜含量大于检出限;无效：C线不显色，表明本次检测结果失效。

  2.6 氨苯砜胶体金免疫层析试纸条的质量评估方法

  检出限确定：在空白牛尿液样品中分别添加质量浓度为0、1.25、2.5、5、10μg/L的氨苯砜标准品，使用3个不同批次的试纸条进行检测，根据试验结果确定氨苯砜快速检测试纸条的检出限。

  特异性试验：选择与氨苯砜化学结构、功能相似的药物(葡胺苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜)进行检测，分别配制0、5、50μg/L的上述药物及氨苯砜溶液，使用试纸条进行检测，判断试纸条的特异性。

  准确性试验：取实验室保存的空白牛尿液样品和添加氨苯砜2.5、5、10μg/L的牛尿液样品各50份，使用3个不同批次的试纸条进行检测，分别计算假阳性率和假阴性率;此外，取20份盲样样本，根据相关标准方法(进出口动物源性食品中氨苯砜及其代谢产物残留量检测方法液相色谱-质谱/质谱法)对样品进行检测，同时用氨苯砜试纸条进行检测，比较两种方法的一致性。

  稳定性试验：将试纸条密封于铝箔袋中，于室温环境下保存，每个月随机选取一定数量的试纸条对添加氨苯砜5μg/L的牛尿液样品进行检测并重复检测3次，连续测定18个月。

  三、氨苯砜胶体金免疫层析试纸条的检测结果与分析

  3.1 氨苯砜相关抗原鉴定结果

  由于氨苯砜分子量较小，需将氨苯砜-OVA偶联物作为免疫原以获得抗氨苯砜的多克隆抗体，将氨苯砜-BSA偶联物作为包被原包被到NC膜上进行检测。通过紫外扫描初步鉴定可知，氨苯砜的特征吸收峰位于260nm处，OVA和BSA蛋白的特征吸收峰位于280nm处，而氨苯砜-OVA和氨苯砜-BSA偶联物的特征峰在270nm和315nm处有2处特征吸收峰，说明氨苯砜-OVA和氨苯砜-BSA偶联成功，成功获得了用于免疫的氨苯砜免疫抗原和制备试纸条的包被抗原。

  3.2 氨苯砜胶体金试纸条的检出限结果

  在牛尿液中添加不同浓度的氨苯砜标准品，使其浓度分别为0、1.25、2.5、5、10μg/L，使用氨苯砜快速检测试纸条进行检测。结果显示，当牛尿液中氨苯砜含量为0、1.25、2.5μg/L时，C线比T线显色浅，检测结果为阴性;当氨苯砜含量为5、10μg/L时，T线显色比C线浅，平行试验间检测结果均为阳性，由此确定该试纸条的检测限为5μg/L，检测时间仅需10min，可实现氨苯砜残留的快速筛查。

  3.3 氨苯砜胶体金试纸条的特异性结果

  使用氨苯砜快速检测试纸条检测与氨苯砜化学结构、功能相似的不同浓度药物(葡胺苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜)时，结果均为阴性;而对超出检测限的氨苯砜进行检测时，结果呈阳性，具体结果如下表所示，表明该试纸条可特异性检测氨苯砜的残留，与其他相似药物无交叉反应，特异性良好。

  3.4 氨苯砜胶体金试纸条的准确性结果

  取实验室保存的空白牛尿液样品和添加氨苯砜2.5、5、10μg/L的牛尿液样品各50份，使用3个不同批次的试纸条进行检测。结果显示，空白牛尿液样品中未检测出阳性结果;氨苯砜添加量为2.5μg/L的牛尿液样品检测中，出现4例阳性结果;当氨苯砜添加量为5μg/L和10μg/L时，检测结果全部为阳性，未出现阴性结果，该方法的假阳性率为1.33%(4/300)，假阴性率为0。

  取浓度不同的20份实际盲样样本，分别用氨苯砜胶体金快速检测试纸条和液相色谱-质谱/质谱法(HPLC-MS/MS)进行检测，检测结果如下表所示，两种方法的检测结果相符，表明两者具有较好的一致性，试纸条检测结果准确可信。

  3.5 氨苯砜胶体金试纸条的稳定性结果

  将试纸条常温密封保存，期间用含氨苯砜5μg/L的牛尿液每月进行1次检测，连续检测18个月。结果显示，前13个月内试纸条检测结果无异常，均为阳性;在第14个月至第18个月的检测中，试纸条偶有出现假阴性，结果不稳定。整体来看，试纸条的稳定性可满足现场使用的要求，常温密封保存下，有效保质期可达13个月。

  四、氨苯砜检测技术的应用价值与行业适配性

  氨苯砜虽在医疗、养殖领域有一定应用，但因其残留危害显著，全球范围内对动物源性食品中氨苯砜的监管日益严格。2026年氨苯砜行业监管趋严的背景下，基层检测需求大幅提升，传统检测方法已无法适配行业发展需求。本次研制的氨苯砜胶体金免疫层析试纸条，以牛尿液为检测样本，无需复杂前处理，仅需简单离心即可完成样品制备，检测时间缩短至10min，检测限达到5μg/L，且特异性良好，与葡胺苯砜、苯丙砜、醋氨苯砜等相似药物无交叉反应。该试纸条假阳性率仅为1.33%，假阴性率为0，与高效液相色谱-质谱法检测结果一致性较好，准确性可靠;常温密封保存13个月内检测结果稳定，可满足基层现场快速检测的需求。与传统检测方法相比，该试纸条携带方便、操作简便、检测成本低，无需专业操作人员和昂贵设备，可实现牛养殖过程中氨苯砜使用情况的实时监测，且检测样本为尿液，不会对动物造成伤害，解决了传统检测方法滞后性、侵入性的痛点。

  检测过程中出现的个别假阳性结果，主要源于两方面原因：一是牛尿液成分复杂、离子浓度高且pH值差异较大，而样品前处理仅进行简单离心，未进一步净化;二是胶体金标记的氨苯砜多克隆抗体，可能会随时间推移、环境温度和pH值变化发生一定降解，或不同批次试纸条存在轻微个体差异。但假阳性率极低，结合高效液相色谱-质谱法的验证结果，可进一步确保检测结果的准确性，不会影响实际应用中的监管效果。

  五、总结

  结合2026年氨苯砜行业“监管趋严、检测精细化、现场化”的发展趋势，本次围绕氨苯砜残留检测需求，成功研制出氨苯砜胶体金免疫层析试纸条，全面完成了抗原抗体制备、试纸条组装、质量评估等一系列试验，保留了全部核心检测数据。该试纸条检测限为5μg/L，检测时间10min，假阳性率1.33%，假阴性率0，特异性良好，与高效液相色谱-质谱法检测结果一致性高，常温密封保存13个月内稳定性良好。与传统检测方法相比，该试纸条具有操作简便、携带方便、检测成本低、无侵入性等优势，可快速检测牛尿液中氨苯砜残留量，实现牛养殖过程中氨苯砜使用情况的实时监测，有效填补了基层现场快速检测氨苯砜的技术空白。该检测技术的研制，不仅适配2026年氨苯砜行业检测需求的升级，为动物源性食品中氨苯砜残留监管提供了高效、便捷的技术手段，也进一步保障了牛肉产品安全，具有较强的基层应用价值和行业推广前景，对规范氨苯砜使用、防范食品安全隐患具有重要意义。