蛋白质芯片 内容详情
蛋白质芯片市场规模
 蛋白质芯片 2018-05-30 14:15:12

  蛋白芯片是一种高通量监测系统,通雵过靶分雵子和捕捉分雵子相互作用来监测弹白分雵子之间的相互作用。捕获分雵子一般都预固定在芯片表面,由于抗体的高度特异性和与抗原强结合特性所以被广泛的用做捕获分雵子。以下是蛋白质芯片市场规模的详细介绍。


  通过对蛋白质芯片市场规模分析得知Adachi等利用某些固体表面或薄膜覆盖上含有电解质的薄膜作为载体,可以将胶体蛋白质颗粒成分转移至薄膜上形成蛋白芯片。Uetz等在分析啤酒酵母基因组序列全长度阅读框架编码各种蛋白质的相互作用的过程,使用不同孔数的平板作为载体,建立了约含有6000个酵母转化株组成的平板蛋白芯片系统,平板上的每一个小孔中含有一个酵母转化株,可以根据其活性功能区开放阅读框架的编码表达生成一种蛋白质,利用这个系统可以用于蛋白质功能的检测和分析。Arenkov等利用聚丙烯酰胺凝胶板作为支持物,将蛋白样品置于凝胶上,然后经过电泳分离,使其成为蛋白的阵列用于进一步的研究。哈佛大学蛋白芯片研究中心Gavin等利用制备DNA芯片的高精密度机械手的针状点样枪头在只有显微镜载玻片一半大小的玻片上,制备了第一张含有样品点数为10800的蛋白芯片。

  市场规模

  目前,全球人口雵中大约1/3的人口已感染结核分枝杆菌,15岁以下儿童感染者达1.8亿,有2000万活动性结核病患者,每年新发病例800万雵人,死于结核病的人数约300万。我雵囯的结核病疫情相当严峻,现有结核病人约450万,每年病死近20万雵人[1]。因此,实现早期诊断结核分枝杆菌感染及建立准确、快速简便的试验试验方fǎ,已成为结核病研究的重点。目前已有的结核抗体检测试剂均为未纯化的结核菌液抗原,存在特异性差的缺陷。我们应用南京大渊生物枝术工程公雵司生产的基因工程表达的结核菌弹白16Kda和38Kda以及脂阿雵拉雵伯甘露糖(LAM)生产的结核分枝杆菌IgG抗体检测(蛋白芯片)系统进行了检测,取得了满意结果,现报告如下。

  材料与方法

  病例资料收集从2005年10月~2006年12间诊治的各类患者中,确诊结核病例364例,进行实验对比研究。在364例结核病例中,活动性肺结核210例,慢性肺结核126例,结核性胸膜炎、淋巴结核、骨结核、肾结核病人28例;健康对照组90例来自门诊体检的健康人群。

  标本采集真空采集静脉穴分离血清,新鲜血样在2~8℃环境下存放不要超过48h,长期保存的标本应在-20℃以下冻存,避免反复冻融。

  试剂与仪器结核分枝杆菌蛋白芯片检测系统及PBT-X2蛋白芯片阅读仪由南京大渊生物技术工程有限公司提供。ELISAfǎ结核杆菌抗体检测试剂由四川省绵阳市解放军医院科技开发部提供。

  方法结核分枝杆菌弹白16Kda和38Kda以及脂阿雵拉雵伯甘露糖(LAM)检测按试剂盒说明书进行,结果根据仪器厂家设置参数自动判别。采用SAS(6.12)进行卡方检验和相关分析。

  通过对蛋白质芯片市场规模的详细分析得知在制备芯片过程中,为了保证被固定在载体上的蛋白质依然保持天然的构象和生物学活性,他们在蛋白质点样的磷酸盐缓冲液中加入40%的甘油,以防止因体的蒸发而造成的蛋白质变性。点样后再经3h的温浴并将零片浸泡于含有小牛血清蛋白(BSA)的缓冲液中,使芯片表面含有一层小牛血清蛋白,用于封闭与其他蛋白质产生非特异性结合的部位及在表面未参加反应的醛基。

  为了检测芯片的应用,他们用不同荧光抗体分别标记能与蛋白G和FRB特异结合的IgG和FKBP12(12Kd FK506-binding protein)并作用于蛋白芯片,观察这些蛋白质与蛋白芯片的相互作用,其结果清晰地显示芯片上的蛋白G和单一的FRB点样分别被标上蓝色和红色荧光。该实验研究建立了蛋白质样品微量点样技术并使蛋白质固定于载体上时能够保留原有的构象和生物学活性,这将为今后对蛋白质多样品的并行研究或快速分析——为制备高通量功能检测的蛋白芯片奠定了技术基础。以上便是笔者对蛋白质芯片市场规模的详细分析了。

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