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蛋白芯片发展前景
 蛋白芯片 2018-07-12 14:44:53

  蛋白芯片是一种高通量监测系统,通过靶分子和捕捉分子相互作用来监测蛋白分子之间的相互作用。捕获分子一般都预固定在芯片表面,由于抗体的高度特异性和与抗原强结合特性所以被广泛的用做捕获分子。以下对蛋白芯片发展前景分析。

  蛋白质芯片,更确切是叫法是蛋白质微阵列,它的概念其实非常简单,就是把多个蛋白质以阵列的形式固定在基片上。它的核心还是蛋白质本身,只是实现了多个蛋白质同时检测(高通量),因此,效率调高了,工作减少了,用得样本也减少了,一次实验获得的数据增多了。蛋白质芯片最关键的就一个词就是“addressable”,可寻址,即对每个蛋白质打上一个位置标签,这样就能相互之间分辨,我想这就是理解蛋白质芯片最核心的一点。

  既然蛋白质芯片的本质还是蛋白,所以它的种类也是按照蛋白分类的,常见的有这几种:第一种是抗体芯片,用来检测样本中的抗原,现在市面上常见的细胞因子抗体芯片、磷酸化抗体芯片;第二种是重组蛋白质芯片,这是我们公司主要的产品。我们有一款结核分枝杆菌的蛋白质芯片,一张芯片上涵盖了所有的结核杆菌的蛋白质,一共4000多个。

  蛋白芯片技术的特点

  1、 反应快速,灵敏度高。反应环境为液相、微球上固定的探针与待检样品均在溶液中反应,其彼此间碰撞几率与速度相对于固相芯片或ElISA等反应模式,可增加 1O倍以上,因此可提高反应速度及灵敏度。抗原一抗体等蛋白质分子相互作用的结果可在瞬间经激光判定后由电脑以数据信息的形式记录下来,敏感性显著超越酶 联信号或常规杂交信号检测。

  2、通量大,可同时检测多种目标物,所需成本较低,减少人力消耗,可对同一样品中多达100种分子同时进行分析。液相芯片系统采用96孔板为反应容器,在35~60min内,可对96个不同的样品进行检测,所需样品用量比常规方法少。

  3、可进行多元化分析,灵活性好,可适用于各种蛋白质分析,应用广泛。通过对微球表面的修饰,可固定各种抗体或受体分子,从而满足不同检测和功能的研究需要。

  为了检测芯片的应用,他们用不同荧光抗体分别标记能与蛋白G和FRB特异结合的IgG和FKBP12(12Kd FK506-binding protein)并作用于蛋白芯片,观察这些蛋白质与蛋白芯片的相互作用,其结果清晰地显示芯片上的蛋白G和单一的FRB点样分别被标上蓝色和红色荧光。该实验研究建立了蛋白质样品微量点样技术并使蛋白质固定于载体上时能够保留原有的构象和生物学活性,这将为今后对蛋白质多样品的并行研究或快速分析——为制备高通量功能检测的蛋白芯片奠定了技术基础。

  蛋白质芯片有很多的优势,最突出的一点就是高通量,在一个反应中可以检测成千上百的指标,而且每个指标之间基本上没有相互干扰,这是其它检测技术很难做到的。第二,微型化,所以样本消耗量很少,对于比较珍贵的临床样本就是非常大的一个优势;第三,灵敏度很高。蛋白质芯片上固定的蛋白,虽然量少,但是局部浓度很高,检测样本时有一个浓缩的效应,并且通过级联放大和荧光检测,可以现实高灵敏度检测。第四,可以实现定量。在检测时可设定标准曲线,这样的可以做定量检测,当然,这个需要标准品可获得的前提下。以上对蛋白芯片发展前景分析。

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